Xét nghiệm chẩn đoán mô miễn dịch tủy xương cho dấu ấn trên máy tự động

2017-09-28 04:55 PM
Xét nghiệm và chẩn đoán mô miễn dịch tủy xương cho một dấu ấn trên máy nhuộm tự động, chỉ định, chống chỉ đinh, nhận định kết quả.

Nguyên lý

Nhuộm hóa mô miễn dịch mảnh sinh thiết tủy xương là phương pháp nhuộm sử dụng các kháng thể đã biết để xác định kháng nguyên có trong tổ chức tủy xương. Đây là kỹ thuật kết hợp phản ứng miễn dịch và hóa chất trên máy nhuộm chuyên dụng để làm hiện rõ các kháng nguyên hiện diện trong tế bào (bào tương, màng tế bào, nhân tế bào).

Chỉ định

Nghi ngờ u lympho xâm lấn tủy xương;

Nghi ngờ K di căn tủy xương;

Nghi ngờ tăng sinh bất thường các dòng tế bào trong tủy xương.

Chống chỉ định

Không có chống chỉ định.

Chuẩn bị

Người thực hiện

Kỹ thuật viên chuyên khoa xét nghiệm thực hiện kỹ thuật máy;

Bác sĩ chuyên khoa huyết học thực hiện phân tích kết quả.

Dụng cụ

Máy nhuộm hóa mô miễn dịch;

Máy cắt tiêu bản;

Bàn sấy;

Micropitpet + đầu côn;

Giá cài tiêu bản;

Lam kính chuyên dụng (theo máy);

Lamen gắn tiêu bản (theo máy);

Gạc sạch.

Hóa chất

Các hóa chất khử parafin;

Cồn;

Nước cất, nước rửa (Dewax);

Dung dịch Buffer (IHC);

Kháng thể 1 (Anti Human - tùy từng CD theo chỉ định);

Kháng thể 2 (Envision + HRP - REF: K5007);

Bộ định màu DAB + Chomogen (REF: K5007);

Dung dịch Hematoxylin 5% 100ml;

Boom Canada: Lấy ra cốc nhỏ, để trong tủ 600C.

Bệnh phẩm Lốc nến mảnh sinh thiết tủy xương.

Các bước tiến hành

Chuẩn bị tiêu bản

Đúc khuôn parafin mảnh sinh thiết tủy xương đã được xử lý, làm nguội và để trong tủ lạnh 2 - 80C.

Cắt tiêu bản mỏng 0,2 mm, dán trên lam kính chuyên dụng.

Sấy khô tiêu bản trong tủ ấm 370C trong thời gian 12 giờ.

Tiến hành nhuộm

Khởi động máy nhuộm;

Xác lập quy trình chạy; Xác định quy trình cho từng lam kính;

Chọn hóa chất, kháng thể sử dụng theo chỉ định;

In nhãn dán lên lam kính; Đặt từng lam kính vào khay chứa lam; Nạp khay chứa lam vào máy.

Tiến hành nhuộm lam cho từng tiêu bản với loại kháng thể phù hợp theo chương trình đã cài đặt; Theo dõi tình trạng và tiến trình vận hành máy;

Kết thúc nhuộm: Tháo khay chứa lam kính, lấy lam kính và gắn lamen.

Nhận định kết quả

Việc nhận định kết quả hình thái được khẳng định ở hai tiêu chí: âm tính và dương tính.

Âm tính: Trên kính hiển vi quan sát thấy nhân của các tế bào bắt màu xanh tím của Hematoxylin, nguyên sinh chất không có biểu hiện gì.

Dương tính: Nếu có sự hiện diện kháng nguyên trên tế bào, phức hợp kháng nguyên - kháng thể - DAB Chromogen sẽ cho màu vàng nâu trên nguyên sinh chất của tế bào, nhân của tế bào bắt màu xanh tím của Hematoxylin.

Sai sót thường gặp

Xử lý mảnh sinh thiết không tốt;

Thời gian nhuộm các bước không phù hợp;

Kỹ năng của người thực hiện kỹ thuật chưa ổn định.

Bài xem nhiều nhất

Chọc hút tủy xương xét nghiệm tủy đồ bằng máy khoan cầm tay

Chọc hút tủy xương xét nghiệm tủy đồ bằng máy khoan cầm tay, chỉ định, chống chỉ đinh, chuẩn bị, các bước tiến hành, nhận định kết quả, sai sót và xử trí.

Phát hiện chất ức chế phụ thuộc thời gian và nhiệt độ đường đông máu nội sinh

Phát hiện chất ức chế phụ thuộc thời gian và nhiệt độ đường đông máu nội sinh, chỉ định, chống chỉ định, các bước tiến hành, nhận định kết quả.

Tổng phân tich tế báo máu ngoại vi bằng máy laser

Quy trình kỹ thuật tổng phân tich tế báo máu ngoại vi bằng máy laser, nguyên lý, chỉ định, chống chỉ định, chuẩn bị, tiến hành và phân tích kết quả.

Huyết đồ bằng máy laser

Huyết đồ bằng máy laser, chỉ định, chống chỉ định, chuẩn bị, các bước tiến hành, nhận định kết quả, sai sót và xử trí.

Xét nghiệm sức bền hồng cầu

Xét nghiệm sức bền hồng cầu, nguyên lý, chỉ định, chống chỉ định, chuẩn bị, các bước tiến hành, nhận định kết quả, sai sót và xử trí.

Đo độ đàn hồi cục máu

Đo độ đàn hồi cục máu, nguyên lý, chỉ định, chống chỉ định, chuẩn bị, các bước tiến hành, nhận định kết quả.

Xét nghiệm mô học tủy xương

Xét nghiệm mô học tủy xương, nhận định chung, chỉ định, chống chỉ đinh, chuẩn bị, các bước tiến hành, nhận định kết quả.

Xét nghiệm sàng lọc huyết sắc tố E

Xét nghiệm sàng lọc huyết sắc tố E, nguyên lý, chỉ định, chống chỉ định, chuẩn bị, các bước tiến hành, nhận định kết quả, sai sót và xử trí.

Huyết đồ bằng máy tự động

Huyết đồ bằng máy hoàn toàn tự động, chỉ định, chống chỉ định, chuẩn bị, các bước tiến hành, nhận định kết quả, sai sót và xử trí.

Xét nghiệm nhuộm photphatase kiềm bạch cầu

Xét nghiệm nhuộm photphatase kiềm bạch cầu, nguyên lý, chỉ định, chống chỉ định, chuẩn bị, các bước tiến hành, nhận định kết quả.